一、微卫星dna一般出现在哪个序列

应用微卫星DNA对Holstein奶牛进行亲子鉴定鲁玉霞

本实验的目的在于通过使用微卫星DNA检测荷斯坦牛的遗传多态性,进而建立一种适用于牛的亲子鉴定体系。微卫星DNA(又称短串联重复序列,或简单重复序列)是以1~6bp的短苷酸为基本单位,首尾相连组成的串联重复序列。大多数重复单位是二苷酸,也有少量含有1、3至6个苷酸的重复单位,重复次数一般在5次以上,可高达100次,片段长度通常在bp以下。微卫星DNA由其心序列和两侧的侧翼序列构成,侧翼序列使某一微卫星特异定位在染色体的一定位置,心序列重复数的不同是构成微卫星多态性的基础。大于10次重复的微卫星DNA序列具有高度的种属多态性,从植物到脊椎动物这种多态性有很大的差别。正是由于微卫星DNA序列具有长度多态性的特点,它可用来对动物进行亲子鉴定。本文选用联合国粮农组织(FAO)和动物遗传学会(ISAG)联合推荐的用于牛遗传分析的12个微卫星基因座,利用PCR和聚丙烯酰胺电泳银染技术对来自不同牛场的100头荷斯坦牛进行了遗传多态性检测。12个STR基因座的杂合度、多态信息含量、有效等位基因数的均值为0.8711、0.8574、8.1666,这些基因座的遗传杂合度及多态信息含量高,均为高度多态位点,12个STR的累积非父排除概率为99.999999%,适用于动物的遗传分析和个体鉴定。应用这12个微卫星基因座对三种不同情况的36头不同家系的荷斯坦牛进行了亲子鉴定:种情况是给定父母双方与子代,排除一方父母的情况;第二种情况是给定父母双方与子代,排除父母双方的情况;种情况是给定一方父母与子代,排除其具有亲缘关系的情况。结果显示三种不同情况下都能成功认定其生物学亲缘关系,因此这12个微卫星位点可以用作亲权鉴定的微卫星标记组合。本实验还对多重PCR的反应条件进行了探索,成功地优化到了该12个基因座四组三重PCR反应条件。四组分别为:组合1: ETH10-BM24-ETH225组合2:BM-INRA023-CSSM66组合3:ILSTS006-THLA53-INRA037组合4: INRA063-HEL9-TGLA126利用多重PCR可以对动物进行遗传分析,但因微卫星片段长度大多为100-300bp,且位点多态性高,同一位点片段长度在不同群体中跨度大,所以在多重PCR的结果分析图上,非特异性条带多,或者有条带重叠而导致判读错误。因此在亲子鉴定中,如果不能使用荧光多重PCR进行分析,那么还是单个位点的PCR分析结果更适合于亲子鉴定。一般认为微卫星DNA多态性产生的原因是DNA复制和修复过程中的碱基的滑动、错配或减数分裂过程中姊妹染色单体的不均等交换。通过测序分析了其中一个微卫星位点不同基因型的重复单元,测序结果显示:分析结果与理论值一致。

[关键词]： [文献类型]： 硕士论文 [文献出处]： 山东师范2008年

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二、微基因亲子鉴定

1、DNA指纹

DNA指纹指具有完全个体特异的da多态性，其个体识别能力足以与手指指纹相媲美，因而得名。可用来进行个人识别及亲权鉴定，同人体DNA的酶切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为DNA指纹。

由于DNA指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性，且仍按简单的孟德尔方式遗传，成为目前更具吸引力的遗传标记，可广泛用于亲子鉴定。

特点：

（1）高度的特异性：研究表明，两个随机个体具有相同DNA图形的概率仅3×10^-11;如果同时用两种探针进行比较，两个个体完全相同的概率小于5×10^-、全世界人口约50亿，即5×10^9、因此，除非是同卵双生子女，否则几乎不可能有两个人的DNA指纹的图形完全相同。

（2）稳定的遗传性：DNA是人的遗传物质，其特征是由父母遗传的。分析发现，DNA指纹图谱中几乎每一条带纹都能在其双亲之一的图谱中找到，这种带纹符合经典的孟德尔遗传规律，即双方的特征平均传递50%给子代。

（3）体细胞稳定性：即同一个人的不同组织如血液、肌肉、毛发、精液等产生的DNA指纹图形完全一致。

2、STR检测

短串联重复序列(

shottademepeat，STR)又称微卫星DNA

(micosatelliteDNA)，是一类广泛存在于人类基因组中的DNA多态性基因座。它由2~6碱基对构成心序列，呈串联重复排列。STR基因位点长度一般在100～300bp之间。因个体间DNA片断长度或DNA序列差异而成高度多态性，在基因传递过程中遵循孟德尔共显性方式遗传。因其基因片段短、扩增效率高、判型准确等特点，被称作第二代DNA指纹，近几年亲子鉴定多采用该方法。

3、SNP

SNP成为代遗传标志,人体许多表型差异、对药物或疾的易感性等等都可能与SNP有关。

4、RFLP分析

限制图谱标记和可见表型重组频率是可测量的，将遗传图谱分为基因型和表型两种分子标记。限制标记成为分子水平上测定遗传基因的有力工具，也是因为它不受对表型有影响的基因组变化。

flp和sp是连锁图谱的基础，对于亲子鉴定具有重要的意义。许多使人致的遗传性疾我们可以知道它在遗传图谱的哪一个位置，但是还不知其对应的基因序列或者蛋白质，如囊性纤维化符合孟德尔遗传规律但是在该基因被标注前，其突变体的分子本质是不知的。人和正常人的da限制图谱的比较中，我们常发现其基因组中出现或者缺失特定的限制位点。如果一个限制性标记与某个表型特征相连锁，则该限制位点定位在该表性特征基因附近。鉴定出该标记具有以下两种意义：提供了诊断疾的程序;为基因的分离提供了参考。

人类基因组频繁出现

sp，这对于绘制遗传图谱是有帮助的。我们可以根据sp的数量推断出人类基因组中每一千到两千个碱基就有一个sp。对于遗传疾的基因的鉴定，就可以通过对更近的sp对其进行快速定位。

同样，flp应用到遗传定位中，我们可以检测未知位点与多态性片段的关系来定位。

flp的出现为亲子鉴定的精确技术提供了基础。对比父母和子女的染色体适当位置的flp图谱，就可以精确判断其亲缘关系。

可能大多数人与一般都是看不明白的，不过不用担心，若真的需要进行亲子鉴定的话，只需要知道自己可以采用da亲子鉴定方法就足够了，具体在da亲子鉴定方法下面应该怎样选择，这应该算是鉴定人员考虑的问题。

三、微卫星检测是不是基因检测

1、SSR分子标记的原理

　SSR标记又称为sequence tagged microsatellite site,简写为STMS，是目前常用的微卫星标记之一。由于基因组中某一特定的微卫星的侧翼序列通常都是保守性较强的单一序列，因而可以将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序，然后根据微卫星的侧翼序列就可以人工合成引物进行PCR扩增，从而将单个微卫星位点扩增出来。由于单个微卫星位点重复单元在数量上的变异，个体的扩增产物在长度上的变化就产生长度的多态性，这一多态性称为简单序列重复长度多态性(SSLP)，每一扩增位点就代表了这一位点的一对等位。由于SSR重复数目变化很大，所以SSR标记能揭示比RFLP高得多的多态性，这就是SSR标记的原理。

2、奥特兰克战场声望

声望和荣誉是两个截然不同的概念，并且获得方法也不一样！声望是靠完成任务来获得的，当然在有些副本如MC，ZUG。。。通过杀小怪也会获得声望的增长！在大战场（奥特兰），你可以通过做战场里可重复任务来获得声望点，并且可以同时提高其他主城的声望~~~~如果你们赢得了战斗会获得更多的声望。在大战场你的同盟在交任务的时候，你也会获得同样的战场声望，但是你不会获得同等的主城声望。（这就是为什么有那么多的刷子）。如果战场持续的时间长，（去年国庆我经历过2天3夜的），我是人类，有声望速度提高10%，我刷了4场，基本上没下过线，就到了崇拜。其他的种族我就不太了解了。阿拉西，我刷军衔的时候从骑士中尉到骑士队长就到了崇拜。基本上只晚上刷10个小时，固定组刷军衔。大概4-5个晚上吧。阿拉西的声望，基本上进去了拔了旗子就会获得50点，然后出战场交荣誉勋章，又会提高~~~青铜龙声望我们都从仇恨开始，要刷很久才能中立，不过我觉得声望的获得很快，1boss前的小怪每个100点，小怪刷新也快，大概30分钟刷新一组

3、奥特兰克战场声望

声望和荣誉是两个截然不同的概念，并且获得方法也不一样！声望是靠完成任务来获得的，当然在有些副本如MC，ZUG。。。通过杀小怪也会获得声望的增长！在大战场（奥特兰），你可以通过做战场里可重复任务来获得声望点，并且可以同时提高其他主城的声望~~~~如果你们赢得了战斗会获得更多的声望。在大战场你的同盟在交任务的时候，你也会获得同样的战场声望，但是你不会获得同等的主城声望。（这就是为什么有那么多的刷子）。如果战场持续的时间长，（去年国庆我经历过2天3夜的），我是人类，有声望速度提高10%，我刷了4场，基本上没下过线，就到了崇拜。其他的种族我就不太了解了。阿拉西，我刷军衔的时候从骑士中尉到骑士队长就到了崇拜。基本上只晚上刷10个小时，固定组刷军衔。大概4-5个晚上吧。阿拉西的声望，基本上进去了拔了旗子就会获得50点，然后出战场交荣誉勋章，又会提高~~~青铜龙声望我们都从仇恨开始，要刷很久才能中立，不过我觉得声望的获得很快，1boss前的小怪每个100点，小怪刷新也快，大概30分钟刷新一组

4、SSR分子标记的原理

　SSR标记又称为sequence tagged microsatellite site,简写为STMS，是目前常用的微卫星标记之一。由于基因组中某一特定的微卫星的侧翼序列通常都是保守性较强的单一序列，因而可以将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序，然后根据微卫星的侧翼序列就可以人工合成引物进行PCR扩增，从而将单个微卫星位点扩增出来。由于单个微卫星位点重复单元在数量上的变异，个体的扩增产物在长度上的变化就产生长度的多态性，这一多态性称为简单序列重复长度多态性(SSLP)，每一扩增位点就代表了这一位点的一对等位。由于SSR重复数目变化很大，所以SSR标记能揭示比RFLP高得多的多态性，这就是SSR标记的原理。

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