毛发分毛根、毛干、毛尖三部分。毛根含有染色体DNA,但自然脱落的毛发根部含染色体DNA量极少。毛干部分含有线粒体DNA,随着近年来测序技术的发展,通过毛干mtDNA测序作个体识别已经成为较常见的技术。
(一)毛根DNA提取
1.有机提取法:
(1)取带毛根的毛发1根用乙醚洗涤去油脂,乙醇清洁表面,干燥。
(2)将单个发根剪入1.5ml离心管中,加入100µl TES(100mmol/L NaCl,10mmol/L EDTA,10mmol/L Tris - HCl pH8.0)、10% SDS 10µl和10mg/ml蛋白酶K 1µl,混匀,55℃水浴2h或37℃温浴过夜。
(3)用等体积饱和酚、酚/氯仿、氯仿各抽提一次。
(4)加1/10体积3mol/L醋酸钠(pH5.2),2倍体积预冷无水乙醇,混匀,沉淀DNA。10000r/min离心10min,弃去上清。
(5)真空干燥,10µl消毒去离子水溶解DNA备用。
2.Chelex - 100提取法
将0.5cm发根剪入1.5ml离心管中,灭菌水、乙醇分别清洗两次,晾干后加入5﹪Chelex - 100 50µl~100µl,以下步骤同Chelex - 100提取血液DNA。
3.直接煮沸法
将单个毛根剪入1.5ml离心管中,灭菌水、乙醇分别清洗两次,晾干后加入50µl~100µl灭菌水,沸水煮10min,4℃备用。
(二)毛干mtDNA提取
1.取lcm长毛干,用乙醇擦拭,放人1.5ml离心管中。
2.灭菌水、无水乙醇分别浸泡两次,每次10min。
3.晾干后如入64µl TES(10mol/L Tris pH8.0,10mmol/L EDTA,100mmol/L NaCl),10﹪SDS 20µl,10mg/ml蛋白酶K8µl,1mmol/L DTT 8µl,混匀,37℃温浴消化过夜。
4.待毛干消化完全后,等体积酚氯仿抽提,收集上清备用。
相关评论:
科鉴基因来自河北廊坊的客户反馈:一年的毛发未检测出,二岁多的小孩毛发样本检测出。
2015年做的个人亲子鉴定,大人采集的带毛囊的头,但是放置了有一年多,小孩的二岁多,也采集的带毛囊的头发,送到鉴定中心,说是更好提供五岁以上两根拔起的毛发,两种样本都是不符合标准要求的,样本已经送到鉴定中心,想检测看看,一周左右,实验完全,孩子的毛发样本检测到DNA数据,大人的没有检测到,可能是放置的时间太长。之后2016年好不容易补到大人的毛发样本,就很快送到鉴定中心。检测得到大人的DNA数据,与之前检测的小孩的DNA数据比对,得到结果。
科鉴基因来自河北固安的客户反馈:2根带毛囊的头发到北京做亲子鉴定。
2016年做的个人亲子鉴定,当时只采集男方的两根毛发,毛囊很明显,且能粘在纸上。到鉴定中心知道毛发要求五岁以上两根拔起更少五根带毛囊的。两根有点少,如果检测结果不够,可以补样加测或是重新检测。一周左右,得到结果。
在不同的亲子鉴定,接受程序是不同的,所以在准备去亲子鉴定,之前,更好去了解,咨询,DNA亲子鉴定中心,那里的会在线回答问题,告诉我它适合亲子鉴定类型,并在亲子鉴定做一些预防措施。以下是检测,的DNA必须携带毛囊的知识的详细介绍。
毛发-采集方法
准备干净的白纸和信封
头发检测dna必须要带毛囊吗
采样台阶
1、用手抓住毛发的根部,拔出至少5个头发毛发,末端可以看到清晰的毛囊,即根部的白色或黑色物质)。
2、将拔下的毛发在温下干燥几分钟(新拔下的毛囊很粘),然后用干净的纸包起来,放入信封中。
3、把不同的样本分开放,注意不要互相碰,放在不同的纸信封里,上面清楚地标明样本所属的人的身份和姓名。
专家指出,头发是亲子鉴定,更常见和使用更多的样本,许多人会选择头发作为亲子鉴定。但头发也是采集更容易出错的样本。那么,什么样的头发样本是有效的呢?
专家建议:在样本,头发,采集,洗手,不要碰头发,的毛囊也就是头发根部的白色物质这种白色物质是DNA检测,的有效样本,切头发不能亲子鉴定。
除了专家所说的,采集和头发做亲子鉴定?张的时候还总结了几点注意事项采集:做头发检测DNA一定要带毛囊吗
1、做亲子鉴定长时间检查也不是不可能的。尽量保持在两周以内。
2、更好是直接把头发的样本从头上拉下来。在大多数情况下,自然脱落的头发不能提取足够的DNA。
3、太小的孩子不要用头发当亲子鉴定建议用口腔拭子头发毛囊发育不全的孩子太小不能提取足够的DNA。
4、只要DNA亲子鉴定,有有效的头发样本,建议采集有3-5个
小贴士:只要采集,有足够的头发和样本,可以在7天内出具亲子鉴定报告。因此,头发可以成为亲子鉴定
如何做亲子鉴定
1、亲子关系技巧和方法
(1)传统亲子鉴定是血型检测。通常,儿童可以做6个月以上,需要大量的血液。这种方法很麻烦,采样困难,错误率高。传统的血型判断在一定程度上有其作用,但不能以鉴定和亲子鉴定的血型为依据
DNA亲子鉴定。DNA亲子鉴定可以由通过在身体的任何组织上(如口腔上皮)或在孩子出生前进行。这种方法是目前亲子鉴定中更准确的一种,准确率可达99%。99.999%,精致简单快捷,经济实用。亲子关系相对几率(RCP)。根据国内外亲子鉴定的实践,当RCP值大于99 (73%)时,可以假设父母与子女之间存在相对关系。
(3)检测民族党。目前,DNA亲子鉴定将人类基因组中的重复碱基序列(STR作为第二代分子标记)和聚合酶链反应技术用于个体鉴定。然而,STR有很大的局限性。SNP是第三代分子标记技术,是未来的发展方向。
如何选择亲子鉴定样本
因为每个人的情况不同,所以每个人选择的隐私亲子鉴定和样本个人也不同。更直接的方法是咨询,安康经过专注判断,我们可以做出样本可以在采集,样本不能在的委托人,了解,
如果是小孩,更好是口腔拭子的采集和样本有血痕,这是因为口腔拭子,有血渍和丰富的DNA含量,基本不会不能用。样本不适合儿童,如头发和指甲,因为儿童的头发和指甲没有完全发育,在采集不能有足够的DNA
如果你年龄比较大,有一些认知孩子,要注意采集样本的隐私,我们推荐采集,的头发,牙刷,指甲口香糖等样本,容易采集但是不容易被发现。总的来说,选择个人隐私亲子鉴定和样本更重要的是保护个人隐私,同时尽量利用DNA含量富裕、采集,性别比高的样本,其中血痕、口腔拭子,毛发等常规样本
如果是胎儿,鉴定样本是孕妇静脉血,假定父亲样本是静脉血,血痕,口腔拭子,指甲,精液,精斑,等。
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